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积雪草提取物

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参数

产品描述:

【产品名称】:积雪草提取物 Hydrocotyle asiatica extract

【CAS】:84696-21-9

【EINECS】:283-640-5

【使用部位】:双子叶植物伞形科Umbelliferae 积雪草Centella asiatica(L.) Urban 的干燥全草或带根全草

【原料描述】:本品为伞形科植物积雪草的干燥全草。夏、秋二季采收,除泥沙, 晒干。本品常卷缩成团状。根圆柱形,长 2〜4cm,直径 1〜1.5mm表面浅黄色或灰黄色。茎细长弯曲,黄棕色,有细纵皱纹,节上常着生须根。叶片多皱缩、破碎,完整者展平后呈近圆形或肾形,直径 1〜4cm;灰绿色边缘有粗钝齿; 叶柄长 3〜6cm,扭曲。伞形花序腋生,短小。双悬果圆形,有明显隆起的纵棱及细网纹,果梗甚短,气微,味淡。本品按干燥品计算,含积雪草苷(C48H78O19)和羟基积雪草苷(C48H78O20)的总量得少于 0.80%。

【原料产地】: 陕西、安徽、广西、四川

 


【有效成分研究】:

1. 三萜类         

 积雪草全草主要含多种三萜类成分,其中有积雪草苷(asiaticoside,C48H78O19 ,M:959.15,mp:235-238c, 药理活性成分、质量标志成分) 、羟基积雪草苷(madecassoside, C48H79O20 ,mp:220-223c)、玻热模甙(brahmoside)、玻热米甙(brahminoside)、参枯尼甙(thankuniside)、异参枯尼甙(isothankunside)和斯理兰卡积雪草甙(centelloside)[2],积雪草二糖苷(asiaticodiglycoside,mp.225-227C) [3]等,均为五环三萜皂甙,最近报导[4],发现新的三萜类成分,积雪草皂苷B, 积雪草皂苷C, 积雪草皂苷D。积雪草中还有多种游离的三萜酸:积雪草酸(asiatic acid,C30H48O5;mp:242-244C)、羟基积雪草酸(brahmic acid or madecassic acid,mp:265-268c)、异参枯尼酸(isothankunic acid)和Ternomilic acid  [2] 马达积雪草酸(madasiatic acid),centic acid,centoie acid, cenellic acid,indocentic acid [3]  ,6-羟基积雪草酸(6-B-OH-hydroxyasiatic acid) [5] 等。

2. 多炔烯烃类

积雪草中还含有多炔烯烃类成分, 如:C16H21O2,C19H27O4,C19H27O3,C15H20O2 [3],C19H28O2,C17H24O3 [6]和11-oxoheneicosanyl-cyclohexane和dotriacont-8-en-1-oic acid,3-isoocladecanyl-4-hydroxy-a-pyrone[7],3-o-[a-L-arabinopyranosyl]-2a,3a,6a,23a-tetrhydroxyurs-12-ene-28-oic acid [3]等。

3. 挥发油类

秦氏等[8]从积雪草中鉴定了45个长链的挥发油类成分。其中含量较高的有石竹烯(caryophyllene) ,法尼烯(farnesol) ,榄香烯(elemene), 长叶烯(longifolene) 等。

4. 其他成分

除上述化学成分外积雪草中还含有其他成分,Srivastava R [9]  在积雪草中分离得到Stigmasterol,Stigmasterone和Stigmasteroi-B-glucopyranoside。谷氨酸和天冬氨酸,Vit B1  的存在。Holeman等人[10]  分离得到了倍半萜类成分。何氏等人[11]分离得到了胡萝卜 甙(dauco sterol) 香草酸(vanfllic acid) 。另外还发现含有内消旋肌醇、积雪草糖、胡萝卜烃类、叶绿素、山奈酚、ß-谷甾醇、生物碱以及鞣质等成分。

 


【产品规格】: 积雪草总甙 70%

 


【工艺流程】:


【检测方法】:

 

一:行业标准检测方法

流动相: 乙腈:甲醇:水=26:24:50

波 长:204nm

灵敏度:0.5AUFS

流 速:0.8ml/min

色谱柱: Fuji Silysia C18 5um 4.6mm×250mm

对照品制备:精密称取羟基积雪草甙对照品、积雪草甙对照品各 15mg 于 25m 容量瓶中,色谱纯甲醇溶解并定容至刻度。

样品制备: 精密称取样品 20mg 于 25ml 容量瓶中,色谱纯甲醇溶解并定容至刻度。

 

二:药典检测方法

色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈- 2 mmol/L 倍他环糊精溶液(24 : 76)为流动相;检测波长为 205nm。理论板数按积雪草苷峰计算应不低于 4000。

对照品溶液的制备:取羟基积雪草苷对照品和积雪草苷对照品适量,精密称定, 加甲酵制成每 lml 各含 0.2 mg 的溶液,即得。

供试品溶液的制备:取本品约 50mg,精密称定,置 50ml 量瓶中,加甲醇使溶解, 并稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10u1,注入液相色谱仪,测定,即得。

本品按干燥品计算,含总苷以羟基积雪草苷(C48H78O20)和积雪草苷(C48H78O19)  的总量计,不得少于 55.0%。

 

三:商务部检测方法

A.2.1试剂

A.2.1.1乙腈(色谱纯)。

A.2.1.2甲醇。

A.2.1.3磷酸。

A.2.1.4β环糊精。

A.2.1.52 mmol/Lβ环糊精(pH=4):称取 2.27 gβ环糊精,加水 1000 mL 超声溶解,用磷酸调节 pH 至 4(约加磷酸 0.1 mL),超声混匀,过 0.45μm 水系滤膜。

A.2.2对照品

积雪草苷对照品单体。积雪草提取物定性对照品(供总苷含量测定时定性用,含羟基积雪草苷、积雪草苷、羟基积雪草酸、积雪草酸 4 种成分)

A.2.3仪器和用具

A.2.3.1高效液相色谱仪(紫外检测器或二极管阵列检测器)

A.2.3.2分析天平:感量 0.01mg。

A.2.3.3超声波清洗器。

A.2.3.4针筒式过滤器,0.45 μm 微孔滤膜,有机系。

A.2.4色谱条件

A.2.4.1色谱柱:Luna C18,250 mm ×4.6 mm,5μm。

A.2.4.2流动相

a)流动相 A:2 mmol/Lβ环糊精(pH=4)(A.2.1.6) b)流动相 B:乙腈

A.2.4.3梯度条件:见表 A1

A.2.5 操作步骤

A.2.5.1 积雪草苷对照品溶液的制备:精密称取积雪草苷适量,用甲醇超声溶解, 配制成浓度约为 0.6 mg/mL 的标准使用溶液,过 0.45 μm 有机滤膜,备用。

A.2.5.2 定性对照品溶液的制备:精密称取积雪草提取物定性对照品适量,用甲醇超声溶解,定容,过 0.45 μm 有机滤膜,备用。

A.2.5.3 样品溶液的制备:精密称取积雪草提取物(约含积雪草苷 10%)150 mg, 置 25 mL 容量瓶中,甲醇超声溶解,冷却至室温,甲醇定容至刻度,摇匀,过0.45 μm 有机滤膜,待测。

A.2.5.4 依次注射空白溶液、对照品溶液、定性对照品溶液、样品溶液进行检测, 外标法定量。

 

积雪草苷对照品液相色谱图

 


参考文献

[1] 陈瑶,秦路平,郑汉臣,张朝晖. 积雪草的资源分布与生药学研究. 中国中药杂志,2000,25(1):199~201

[2] 赵宇新,李曼玲,冯伟红,康琛,范莉。积雪草的研究进展.中国中医药信息杂志,2002,(8)9,8,81~85

[3] 张雷磊, 王海生, 姚庆强, 刘拥军,栾阳, 王秀丽. 积雪草化学成分研究. 中草药.2005,36(12):1761

[4] 余传隆, 黄泰康, 丁志遵, 等。中药辞海,中国医药科技出版社,1993,12..2114.

[5] Shukla YN,Srivas tava Ritu, Tripathi AK,et al.Charicterization of an Ursane triterpenoid from Centella asiatica with growth inhibitory activity against Spilarictia oblique Pharm Biol.(Lisse Neth),2000,38(4):262.

[6] 斯里兰卡积雪草中的熊果烷型和齐墩果烷型三萜寡糖苷[英],Matsuda H…//Cherh Pharm Bull-2001,49(10):1368

[7] Srivastava Ritu,Shukla YN.A disubstituted pyrone from Centella Asiatica.Indian Chen,Sect B:Org Chem Incl Med Chem,1997.36B(10):963

[8] 秦路平,丁如贤,张卫路, 等, 积雪草挥发油类成分分析及其抗抑郁作用研究,第二军医大学学报,1998,19(2):186

[9] Srivastava Ritu,Shukal YN,Tripathi AK. Antifeedant compounds from Centella asiatica.Fitoterapia,1997,68(1):93

[10] Holeman M,Theron E,Pinel R.Centella asiatica:Analysis by GC-MS and IRMS.Cosmet Aromes,1994,120,52

 

 

 

 

 

 

 

 

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